【行業(yè)干貨】從原理到實操：一文讀懂薄膜過濾法 vs 平皿法的適用邊界

一、原理不同

1. 薄膜過濾法

• 核心原理：通過過濾裝置將一定體積的供試品溶液通過微孔濾膜（孔徑一般為 0.45μm），將微生物截留到濾膜表面，然后將濾膜轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，通過計數(shù)濾膜上生長的菌落數(shù)來測定供試品中的微生物含量。

• 關(guān)鍵點：利用濾膜的截留作用濃縮微生物，適用于微生物含量較低或含有抑菌成分的供試品。

2. 平皿法

• 核心原理：將一定量的供試品溶液直接接種到瓊脂培養(yǎng)基平板中，通過培養(yǎng)后計數(shù)平板上生長的菌落數(shù)來確定微生物含量。平皿法又可分為傾注法和涂布法：

• 傾注法：將供試品溶液與冷卻至 45℃左右的培養(yǎng)基混合后倒入平皿，凝固后培養(yǎng)。

• 涂布法：將供試品溶液均勻涂布于已凝固的培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)后計數(shù)。

• 關(guān)鍵點：直接利用培養(yǎng)基與供試品接觸，適用于不含抑菌成分且微生物含量較高的供試品。

二、操作流程不同

1. 薄膜過濾法

1. 準備濾膜和過濾裝置：選擇合適孔徑的濾膜，安裝過濾裝置并滅菌。

2. 過濾供試品：將供試品溶液倒入過濾裝置，通過抽濾使溶液通過濾膜，微生物截留在濾膜上。

3. 沖洗濾膜：用無菌沖洗液沖洗濾膜，去除供試品中的抑菌成分（若有）。

4. 轉(zhuǎn)移濾膜：將濾膜無菌轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基表面（如營養(yǎng)瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂等），濾膜表面朝上。

5. 培養(yǎng)與計數(shù)：倒置培養(yǎng)皿，按規(guī)定條件培養(yǎng)后，計數(shù)濾膜上的菌落數(shù)。

2. 平皿法（以傾注法為例）

1. 制備供試品溶液：將供試品溶解或稀釋成適宜濃度的溶液。

2. 稀釋與接種：取一定體積的供試品稀釋液加入滅菌平皿中。

3. 傾注培養(yǎng)基：向平皿中倒入冷卻至 45℃左右的培養(yǎng)基，混勻，待凝固。

4. 培養(yǎng)與計數(shù)：倒置培養(yǎng)皿，培養(yǎng)后計數(shù)平板上的菌落數(shù)。

三、適用場景不同

1. 薄膜過濾法

• 適用情況：

• 供試品含有抑菌成分（如抗生素、防腐劑等），需通過沖洗去除抑菌作用。

• 供試品微生物含量較低（如注射劑、純化水等），需通過過濾濃縮微生物以提高檢測靈敏度。

• 液體供試品（如口服液、注射液、飲料等），過濾操作便捷。

• 不適用情況：固體或黏性供試品需先溶解或處理成液體，操作相對復雜；含大量顆粒雜質(zhì)的供試品可能堵塞濾膜。

2. 平皿法

• 適用情況：

• 供試品不含抑菌成分或抑菌成分已被中和。

• 微生物含量較高的供試品（如食品、化妝品原料等），可直接稀釋后檢測。

• 固體供試品（如片劑、粉劑等），需先制成均勻混懸液。

• 不適用情況：含強抑菌成分的供試品，直接接種可能導致微生物生長被抑制，結(jié)果不準確。

四、優(yōu)缺點對比

五、注意事項

1. 薄膜過濾法：

• 濾膜孔徑需匹配微生物大?。ㄒ话?0.45μm 可截留細菌、真菌）。

• 沖洗次數(shù)和沖洗液體積需根據(jù)供試品特性優(yōu)化，避免過度沖洗導致微生物損失。

2. 平皿法：

• 傾注法需注意培養(yǎng)基溫度，避免高溫殺死微生物。

• 涂布法需確保涂布均勻，避免菌落重疊影響計數(shù)。

總結(jié)

• 選擇依據(jù)：根據(jù)供試品性質(zhì)（是否含抑菌成分、劑型、微生物含量高低）、檢測目的（如微生物限度檢查、無菌檢查）及實驗室條件選擇合適的方法。

• 應用趨勢：薄膜過濾法因能處理復雜樣品且靈敏度高，在藥品和高要求領域應用更廣泛；平皿法因操作簡便，在食品、化妝品初篩中更常見。