一文詳細(xì)了解微生物限度檢查計數(shù)方法

　　微生物限度檢查計數(shù)方法有哪些，一文詳細(xì)為您介紹。

　　1、基本計數(shù)方法

　　計數(shù)方法包括平皿法和薄膜過濾法。檢查時，按已驗證的計數(shù)方法進(jìn)行供試品的細(xì)菌、霉菌及酵母菌菌數(shù)的測定。按計數(shù)方法的驗證試驗確認(rèn)的程序進(jìn)行供試液制備。用稀釋液稀釋成1 : 10、1:100、1:1000 等稀釋級的供試液。

　　(1)平皿法

　　1)常規(guī)法:

　　取經(jīng)驗證的低稀釋級的供試液lml，置直徑90mm的無菌平皿中，注入15~ 20ml溫度不超過45 °C的融化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2個平板。

　　2)培養(yǎng)基稀釋法:取經(jīng)驗證的低稀釋級的供試液lml，等量分注于2個(2.皿法，每皿0.5ml)、5個(5皿法，每IL.O.2ml)或10個(10皿法，每M0.1ml)直徑90mm的無菌平皿中，其它同上。

　　陰性對照試驗取試驗用的稀釋液lml,置無菌平皿中，注入培養(yǎng)基，凝固，倒置培養(yǎng)。每種計數(shù)用的培養(yǎng)基各制備2個平板，均不得有菌生長。

　　2、薄膜過濾法

　　采用薄膜過濾法，一般采用微生物限度檢測儀濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45um,直徑一般為50mm ，若采用其他直徑的濾膜.沖洗量應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整。

　　選擇濾膜材質(zhì)時應(yīng)保證供試品及其溶劑不影響微生物的充分被截留。濾器及濾膜使用前應(yīng)采用適宜的方法滅菌。使用時，應(yīng)保證濾膜在過濾前后的完整性。

　　水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品，其濾膜和濾器在使用前應(yīng)充分干燥。

　　為發(fā)揮濾膜的最大過濾效率，應(yīng)注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個濾膜表面。

　　供試液經(jīng)薄膜過濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml?？倹_洗量不得超過1000ml,，以避免濾膜上的微生物受損傷。

　　取相當(dāng)于每張濾膜含lg、lml或10ccm2供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g、lml 或10 cm2所含的菌數(shù)較多時，可取適宜稀釋級的供試液lml進(jìn)行試驗。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“計數(shù)方法的驗證”。

　　沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備:張濾膜。

　　陰性對照試驗：取試驗用的稀釋液1ml,照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。

　　(2)培養(yǎng)和計數(shù)

　　培養(yǎng)條件和計數(shù)方法同平皿法，每片濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超過100cfu。